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技術(shù)文章

Technical articles
小鼠I型膠原蛋白(Col I)ELISA試劑盒
更新時(shí)間:2022-07-29 點(diǎn)擊次數(shù):593

【產(chǎn)品名稱】

中文名稱:小鼠I型膠原蛋白(Col I)酶聯(lián)免疫試劑盒

 

【包裝規(guī)格】

96T/盒

 

【預(yù)期用途】

僅供科研使用,本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中I型膠原蛋白(Col I)含量。

 

【檢測(cè)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠I型膠原蛋白(Col I)水平。用純化的小鼠I型膠原蛋白(Col I)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入I型膠原蛋白(Col I),再與HRP標(biāo)記的I型膠原蛋白(Col I)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型膠原蛋白(Col I)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠I型膠原蛋白(Col I)濃度。

【產(chǎn)品性能】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,無破損漏氣(如有漏氣,不影響使用)。

2、劑量反應(yīng)曲線線性

標(biāo)準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值,大于等于0.9900。

3、檢測(cè)范圍

15 μg/L -450 μg/L 。    

4、靈敏度

檢出劑量小于3.75 μg/L 。

5、精密度

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批間差:選取3 個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定10 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批內(nèi)差: CV<6.2%

批間差: CV<8.6%

6、回收率

分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍和平均回收率。

注意:使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。

需要但未提供的材料及耗材

  1、酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)

2、精密移液器、吸頭、加樣槽

3、蒸餾水或去離子水

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、EP管

7、無粉一次性乳膠手套

 

【儲(chǔ)存條件及有效期】

  1、2-8保存,切勿冷凍,有效期6個(gè)月。

  2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8冰箱。

注意試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1 個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

【結(jié)果計(jì)算】

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。 



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